MET基因位于人類7號染色體長臂（7q21-31），長度約125 kb，含有21個外顯子。C-MET，又稱為酪氨酸激酶MET， c-MET是一種細(xì)胞表面的跨膜受體蛋白，和其配體HGF（肝細(xì)胞生長因子）結(jié)合后發(fā)生二聚酪氨酸磷酸化，繼而激活眾多下游信號通路如PI3K-Akt、Ras-MAPK、STAT和Wnt/β-catenin等，發(fā)揮促細(xì)胞增殖、細(xì)胞生長、細(xì)胞遷移及血管生成等效應(yīng)。MET通路異常與多種癌癥有關(guān)， c-MET也成為癌癥治療的熱門靶點，諸多c-MET/HGF抑制劑藥物處于臨床研究phase II/III階段。

基于c-Met過表達(dá)和MET ex14跳讀的臨床意義，邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究（蘇州）有限公司基于綜合的轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)技術(shù)平臺進行了c-Met相關(guān)生物標(biāo)志物的深入研究。IHC，F(xiàn)ISH，ARMS Q-PCR，NGS靶向測序等多個平臺都已經(jīng)過充分技術(shù)驗證，在DNA，RNA以及蛋白層面充分評價c-Met相關(guān)生物標(biāo)志物的狀態(tài)，為臨床研究及診療提供中心實驗室技術(shù)檢測服務(wù)和伴隨診斷產(chǎn)品開發(fā)服務(wù)。其中，基于核酸平臺的cMET 14外顯子跳讀檢測試劑盒（qRT-PCR）目前在準(zhǔn)備申報臨床研究，已與國內(nèi)外多家創(chuàng)新藥企洽談或啟動了伴隨診斷產(chǎn)品的合作開發(fā)。

基于病理平臺開發(fā)的c-Met過表達(dá)檢測IHC試劑盒，經(jīng)方法學(xué)驗證制定出如下評分標(biāo)準(zhǔn)：

c-Met過表達(dá)檢測IHC試劑盒評分標(biāo)準(zhǔn)

基于以上評判標(biāo)準(zhǔn)，對如下圖的IHC染色結(jié)果進行分析。（A）顯示染色比例為11%-50%，染色強度為中陽性（2+），因此該患者腫瘤組織c-Met檢測結(jié)果為低表達(dá)；圖4（B）顯示染色比例＞50%，染色強度為中陽性（2+），因此該患者腫瘤組織c-Met檢測結(jié)果為高表達(dá)。其中圖4（C）和圖4（D）均無染色，染色比例為0%，即c-Met不表達(dá)。

腫瘤患者組織IHC染色結(jié)果

邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)建立了c-Met基因擴增的FISH檢測方法，其評判標(biāo)準(zhǔn)如下表所示：

c-Met基因擴增的FISH檢測評判標(biāo)準(zhǔn)

圖（A）為非小細(xì)胞肺癌患者組織樣本的FISH檢測結(jié)果，分析顯示MET/CCP7=3.90﹥2.0，平均MET拷貝數(shù)/細(xì)胞=23.40﹥5.0，提示MET基因擴增為陽性；圖（B）為腎癌患者組織樣本的FISH檢測結(jié)果，分析顯示MET/CCP7=1.04﹤2.0，平均MET拷貝數(shù)/細(xì)胞=2.65﹤5.0，提示MET基因擴增為陰性。

非小細(xì)胞肺癌患者組織樣本的FISH檢測結(jié)果

基于q-PCR平臺，我們自主研發(fā)出一種可從RNA水平特異性檢測c-MET外顯子14跳讀突變的檢測試劑盒，操作簡便，快速精準(zhǔn)，可以更直觀的滿足臨床快速檢測的實際需求，用于指導(dǎo)Crizotinib等c-MET靶向藥物的使用。

c-Met 14外顯子跳讀檢測試劑盒檢測結(jié)果展示

如圖所示：采用雙熒光標(biāo)記，F(xiàn)AM標(biāo)記靶基因c-MET，VIC標(biāo)記內(nèi)參照基因B2M (beta-2微球蛋白)。當(dāng)B2M的ct值大于10，小于等于36時，檢測有效；當(dāng)B2M的ct值小于10 (模板濃度過高)或大于36(模板濃度過低)時，檢測無效。c-MET的ct值≤41，檢測為陽性；如果＞41，則檢測為陰性。

邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的Med1CDx綜合panel包含了幾乎所有已知原癌基因、遺傳性驅(qū)動基因、細(xì)胞周期基因和免疫/炎癥相關(guān)基因等601個基因，可用于對TMB、MMR、MSI、免疫檢查點分子、腫瘤新生抗原和HLA分型等全方位的分析、評估，其中也涵蓋了c-Met 外顯子區(qū)域，即Med1CDx可對MET基因變異（可反推 Exon14 跳讀）和基因異常擴增進行精準(zhǔn)檢測，同時可對c-MET信號通路相關(guān)的其他信號通路做全景描繪，為精準(zhǔn)診斷和臨床用藥提供更準(zhǔn)確的指導(dǎo)。

MED1CDx Panel